倍捷科技-蛋白质纯化-美国Pierce

蛋白质纯化

蛋白质纯化，是将某种蛋白质从细胞裂解液、体液、蛋白质混合溶液分理出来，并进一步去除杂质的过程。方法一般有亲和层析、免疫（共）沉淀、透析。根据分离纯化的步骤又分为初级分离、二级分离、三级分离等。PIERCE提供了一系列完整的产品，可以帮助您实现各种蛋白质的纯化。

产品简介：

纯化或分析某一重组蛋白的第一步一般是破碎细胞，释放蛋白，因此破碎细胞的方法必须保证对目的蛋白没有损害。POPPERS^TM系列蛋白抽提试剂就是这样一种方法，它不但是一种裂解细胞的温和手段，而且也是提取重组蛋白的有效方法。使用这种试剂得到的蛋白产量远超过超声波破碎、冻融、研磨、强去污剂等常用方法的产量。

POPPERS^TM系列细胞裂解/重组蛋白提取与纯化试剂

目录号	产品名称	包装
蛋白抽提
78248	B-PER® Bacterial Protein Extraction Reagent	500ml
78243	B-PER® Bacterial Protein Extraction Reagent	165ml
78266	B-PER® Reagent (in Phosphate Buffer)	500ml
78260	B-PER® II Bacterial Protein Extraction Reagent	50ml
78503	M-PER® Mammalian Protein Extraction Reagent	25ml
78501	M-PER® Mammalian Protein Extraction Reagent	250ml
78505	M-PER® Mammalian Protein Extraction Reagent	1l
78510	T-PER® Tissue Protein Extraction Reagent	500ml
89826	Mem-PER® Eukaryotic Membrane Protein Extraction Kit	Kit
78833	NE-PER® Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit	Kit
78990	Y-PER® Yeast Protein Extraction Reagent	500ml
78991	Y-PER® Yeast Protein Extraction Reagent	200ml
78998	Y-PER®-Plus Dialyzable Yeast Protein Extraction Reagent	25ml
78999	Y-PER®-Plus Dialyzable Yeast Protein Extraction Reagent	500ml
78115	Inclusion Body Solubilization Reagent	100ml
DNA制备
78870	Y-DER™ Yeast DNA Extraction Kit	Kit
78882	Lyse-N-Go™ PCR Reagent	10ml
融合蛋白抽提
78100	B-PER® 6xHis Fusion Protein Column Purification Kit	Kit
78300	B-PER® 6xHis Fusion Protein Spin Purification Kit	Kit
78994	Y-PER® 6xHis Fusion Protein Column Purification Kit	Kit
78200	B-PER® GST Fusion ProteinColumn Purification Kit	Kit
78400	B-PER® GST Fusion ProteinSpin Purification Kit	Kit
78997	Y-PER® GST Fusion ProteinColumn Purification Kit	Kit
报告基因检测
75710	All-in-One Mammalian β-Galactosidase Assay Reagent	3 x 25 ml
75707	All-in-One Mammalian β-Galactosidase Assay Kit	Kit
75768	Yeast β-Galactosidase Assay Kit	Kit

细菌蛋白、GST-蛋白抽提Kit、6×His蛋白抽提Kit

酵母蛋白、GST-蛋白抽提Kit、6×His蛋白抽提Kit

真核细胞膜蛋白抽提Kit

核蛋白和细胞质蛋白抽提Kit

哺乳动物蛋白抽提Kit

组织蛋白抽提Kit

mRNA一管法RT-PCR kit

线粒体纯化kit

镍离子鳌和片（适合96孔板）、蛋白酶抑制剂…………

Seize^TM系列之Primary--免疫沉淀试剂盒

PIERCE最新推出的Seize^TM Primary 免疫沉淀技术是将特异性抗体直接偶联于AminoLink^®加强型活化琼脂糖载体上，通过抗体和抗原的特异性结合，纯化抗原。形成的免疫沉淀树脂可重复使用。沉淀后的目标蛋白可以重新洗脱而得到纯化，非常有利于进一步的SDS-PAGE鉴定。

特点：
· 可以共价偶联任何种类的抗体（包括鸡IgY）。
· 在SDS-PAGE中可消除抗体的重链及轻链条带的干扰。
· 可用于小规模纯化，比其他免疫沉淀法得到更多的目标蛋白。
· 可偶联至少20种抗体，每次偶联的抗体可进行多达10次免疫沉淀反应。
　

AminoLink^® Plus产品对人和鸟类抗体的偶联效率试验
　

室温下用200μl AminoLink^® Plus固定胶偶联来自不同物种的200μg纯化抗体，时间1－4小时。鸡抗体用量为500μg，4个小时内抗体的偶联效率达到了80-88%。

利用Seize^®Primary免疫沉淀法纯化GFP蛋白试验
　

室温下，经亲和层析纯化的羊抗GFP抗体（1mg/ml,200ul）与活化的200ul载体作用4小时，即可完成共价偶联，效率达87%。用此偶联载体沉淀经B-PER®细菌蛋白抽提试剂（产品号#78248）处理而得到的75ul过量表达的BL21GFP蛋白细胞裂解液。在4-20%PAGE胶上分别上样：10%体积比的细胞裂解产物（lysate）、5%体积比的冲洗成分1、2、3（wash 1、2、3）、和10%体积比的洗脱成分1、2、3（Elution 1、Elution 2、Elution 3）。电泳后，用GelCode^® 蓝染试剂（产品号24590）染色分析。其中蛋白质标准（M）为PIERCE的TriChromRanger 预染蛋白质分子量Marker（产品号 26691）。

Seize®Primary免疫沉淀操作流程图：
　

Step 1. 将抗体交联到AminoLink® Plus支持物上

Step 2. 裂解细胞，上样

Step 3. 洗掉没有结合的蛋白

Step 4. 洗脱下结合的蛋白

Step 5. SDS－PAGE电泳分析

参考文献:
1. Bennet, R.M., et al. (1988). The production and characterization of murine monoclonal antibodies to a DNA receptor on human leukocytes. J. Immunol. 140, 2937-2942.
2. Domen, P., et al. (1990). Site directed immobilization of proteins. J. Chromatogr. 510, 293-302.
Gersten, D.M., et al. (1981). Characterization of immunologically significant unique B16 melanoma produced in vivo and in vitro. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78, 5109-5112.
3. Harlow, E. and Lane, D. (1988). Antibodies: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory: Cold Spring Harbor, New York.
4. Hermanson, G.T., et al. (1992). Immobilized Affinity Ligand Techniques. Academic Press, Inc.: San Diego, CA.

Seize®系列相关产品：

类型	产品目录号	名称	包装
Seize ^® Primary	45332	Seize Primary Mammalian Immunoprecipitation Kit	Kit
Seize ^® Primary	45335	Seize Primary Immunoprecipitation Kit	Kit
Seize^® X	45210	Seize X Protein G Immunoprecipitation Kit	Kit
	45215	Seize X Protein A Immunoprecipitation Kit	Kit
	45220	Seize X Bacterial Immunoprecipitation Kit	Kit
	45225	Seize X Mammalian Immunoprecipitation Kit	Kit
	45230	Seize X Yeast Immunoprecipitation Kit	Kit
Seize^® Classic	45213	Seize Classic (A) Immunoprecipitation Kit	Kit
	45217	Seize Classic Mammalian Immunoprecipitation Kit	Kit
	45218	Seize Classic (G) Immunoprecipitation Kit	Kit
Seize^® Coated 96-Well Plates	45350	Seize Protein A/G Coated Plate IP Kit	Kit
	45355	Seize Protein G Coated Plate IP Kit	Kit
	45360	Seize Streptavidin Coated Plate IP Kit	Kit

ProFound™免疫共沉淀试剂盒

您只需要提供抗体即可实现免疫共沉淀

原理图：

此系列试剂盒优点：
1, AminoLink® Plus Coupling Gel与抗体共价结合，不被洗脱，可以重复使用多至10次
2, AminoLink® Plus Coupling Gel与抗体共价结合，不会引入抗体片段污染
3,偶联胶可以与任何纯化的抗体偶联，不管抗体的种属、分类
4,自带CoIP结合缓冲液、用于建立对照CoIP的对照胶
5,离心柱可以高效冲洗
　

订货信息：

货号	产品名称	包装
23600	ProFound™ Co-Immunoprecipation Kit	Kit
23605	ProFound™ Mammalin Co-Immunoprecipation Kit	Kit
28314	Sulfact-Amps® X-100（活性成分是Triton? X-100）	6*10ml
21027	ImmunoPure® Gentle Ag/Ab Elution Buffer	500ml

蛋白质纯化--------去除杂质


Detoxi-Gel^TM Endotoxin Removing Gel （Detoxi-Gel^TM 内毒素去除胶）		产品说明下载
特征及优点：		内毒素去处胶工作图
1. 内毒素去除胶带有固定化的配基，可与热源结合，从而将其从溶液中分离出来
2. 在优化条件下，内毒素去除胶的结合能力可达2mg/ml
3. 一次过柱可达到99%的去除率
4. 用途广泛，可去除蛋白溶液、培养基、药物及缓冲水溶液中的内毒素
5. 用1%的无热源脱氧胆酸钠可将内毒素洗脱，使胶再生

Extracti-Gel™ Detergent Removing Gel （Extracti-Gel™ 去污剂去除胶）		产品说明下载
特征及优点：		去污剂去除胶工作图
1.高效、快速、高蛋白回收率的去污剂回收方法
2. 分子量相对较小的去污剂分子进入胶基质后，与一个特殊配基作用而从溶液中分离出来
3. 低排阻极限的支持介质可以排斥大分子进入胶内，因而减少了产生非特异性结合的可能
4. 建议用于分子量大于10KD的生物大分子


SDS-OUT^TM SDS Precipitation Kit（SDS-OUT^TMSDS沉淀试剂盒）		产品说明下载
特征及优点：
1. 从微升级的样品中去除SDS
2. 可用于最小稀释度的小体积样品
3. 蛋白回收率大于90%

去污剂结合能力的实验数据

名称	目录号	结合能力（mg/ml胶）	结合条件
Brij-35	28316	80	100mM PB PH7.0
CHAPS	28300	50	0.05Tris PH9.0
SDS	28312	80	0.05Tris PH9.0
TritonX-100	28314	57	100mM PB PH7.0
Tween -20	28320	74	100mM PB PH7.0

注意：除上表所列外，还可以从多种含不同缓冲液成分、盐浓度及PH值的溶液中去除去污剂。

用SDS-Out^TMSDS沉淀试剂将SDS从溶液中去除后的蛋白回收率（蛋白溶液含不同浓度SDS）

	初浓度
蛋白^*	0.125%	0.25%	0.5%	1.0%
	%蛋白回收率
BSA	97.5	98.0	98.4	100
细胞色素C	100	100	100	100
大豆胰蛋白酶抑制剂	99.0	98.5	98.8	100
卵清蛋白	99.8	99.6	98.1	93.8
核糖核酸酶A	100	100	100	100
肌红蛋白	100	100	100	97.9

*上表所用蛋白样品是体积为0.5ml，浓度为1mg/ml

订货信息

目录号	产品名称	包装
20344	Detoxi-Gel^TMAffinityPak^TMPrepacked Columns	5x1ml
20339	Detoxi-Gel^TM Endotoxin Removing Gel	10ml
20340	Detoxi-Gel^TM Endotoxin Removing Gel	1,000ml
20208	Extracti-Gel D Detergent Removing Gel	10ml
20303	Extracti-Gel D Detergent Removing Gel	10x10ml
20346	Extracti-Gel D Detergent Removing Gel	5x1 prepacked
20308	SDS-OUT^TM SDS Precipitation Kit 可沉淀总体积达200ml蛋白溶液中的SDS 包括：沉淀剂带刻度的微量样品管（1.5ml）微量过滤器(0.2um醋酸纤维素)	Kit 10ml 12个 12个
20310	SDS-OUT SDS Precipitation Reagent	25ml

美国Pierce公司

昆明倍捷科技有限公司

公司地址：昆明市建设路凤翥街168号2幢801(650031)

电话：0871-6225599 传真：0871-5353029

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