Western Blotting 常规显色底物

辣根过氧化物酶底物

1-StepTM TMB-Blotting

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一种单一组分的过氧化物底物,可产生暗蓝色沉淀。当对实验结果信噪比要求很高时,1-StepTM TMB-Blotting底物是一种很好的选择。但该产品的高灵敏性要求洗涤和封闭时应格外小心以避免背景染色。

   

Chloronaphthol

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4-氯酚和HRP作用而产生一种独特的介于蓝色到蓝紫色之间的颜色,这种颜色容易成像。它在印迹或免疫组化染色中灵敏性低于其它的HRP底物。虽然产生的颜色会因贮藏而褪去,但该反应易控制并且容易成像,一定程度上弥补了这一缺点。

DAB

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DABHRP反应产生棕色的不溶终产物。这种棕色沉淀不溶于酒精和其它有机溶剂,对于必需使用传统复染和封固介质的免疫组化染色应用特别理想。

CN/DAB Substrate Kit

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使用DAB的缺点是棕色产物不能很好的成像。4-CN不如DAB灵敏,但由于产生背景低,成像好。结合这两种底物能产生暗黑色的沉淀。两着结合使用有增效作用,不但提高了灵敏度,而且产生的黑色沉淀成像很好。

AEC

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AECHRP反应生成棕红色的沉淀。由于其鲜明的颜色,AEC常在多重染色方法中用作第二标记。AEC的终产物容易成像。
碱性磷酸酶底物

BCIP and NBT

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是印迹或染色应用的理想选择。它们在碱性磷酸酶作用下反应可生成一种不溶性黑紫色沉淀的强信号。该反应的速度稳定,可准确控制相对灵敏度及反应进程。

Fast Red TR/AS-MX

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Fast Red TR/AS-MX底物试剂盒专为Western印迹,点印迹,或免疫组织化学过程中检测碱性磷酸酶而研制。该底物也适用于在免疫印迹和免疫组化研究中的双染色。亮红色沉淀可与不溶的HRP底物(包括Metal Enhanched DAB TMB-BlottingCN/DAB底物试剂盒)在组织中或硝化纤维膜及尼龙膜上都能形成鲜明的对比。

订货信息

目录号

产品名称

沉淀颜色

包装

34018

1-Step® TMB-Blotting

250ml

34012

1-Step® CN

250ml

34010

4-Chloro-1-Naphthol

25g

34011

4-Chloro-1-Naphthol Tablets

50 tablets

34000

CN/DAB Substrate Kit  

Kit

34001

DAB

10g

34002

DAB Substrate Kit

Kit

34004

AEC

25 g

34040

BCIP

-

1 g

34035

NBT

-

1 g

34042

1-StepTM NBY/BCIP

紫色

250 ml

34070

StepTM NBY/BCIP Plus suppressor

紫色

100 ml

34034

Fast Red TR/AS-MX

亮红

Kit

为什么要将抗体片段化?

抗体片段的优点和特点

 
Fab片段
F(ab’)2
片段 Fc片段
特征 ·不受位于巨噬细胞、B细胞、T细胞、中性粒细胞和巨细胞等细胞上的Fc受体的影响

·不沉淀抗原·比F(ab’)2更易制备和纯化

·在正常组织中分解放射性标记片段比整个IgG偶联物更快·降低免疫原性(Fc区缺失),使人抗鼠免疫球蛋白(HAMA)反应最小化

·更不易遭到吞噬细胞攻击

·不受位于巨噬细胞、B细胞、T细胞、中性粒细胞和巨细胞等上的Fc受体的影响

·保持两价抗原结合位点,这一点被认为对于保持与低亲和力抗原的结合活性很重要

·可沉淀抗原

·用于研究IgG的效应子功能而不受抗原结合位点干扰

·Fc片段可用作组化染色的封闭剂

 

 
   

抗体的片段化试剂盒

 
ImmunoPureFab Preparation Kit (ImmunoPureFab制备试剂盒)

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IgG制备Fab片段的最容易、方便的方法:一个利用固定化木瓜蛋白酶消化人或小鼠IgG分子为FabFc片段的全套试剂盒。酶解后的产物可用试剂盒中提供的固定化蛋白A柱而得到纯化的抗体片段。  
ImmunoPure@ F(ab’)2 Preparation Kit (ImmunoPure@ F(ab’)2 制备试剂盒)

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ImmunoPure@ IgG1 Fab and F(ab’)2  (ImmunoPure@ IgG1 Fab 和 F(ab’)2 Preparation Kit制备试剂盒)

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Ficin消化成的 F(ab’)2片段与用胃蛋白酶从IgG 获得的特征大小相似,但前者具有与完整IgG1抗体相似的免疫反应性及亲和力。如果使用同样方法而在酶解缓冲液中提高半胱氨酸活性浓度,也可由IgG分子直接产生Fab片段。  
原理图

订货信息

目录号

产品名称

包装

44885

Immunopure®Fab制备试剂盒

Kit

20341

固相化木瓜蛋白酶  

5 ml gel

44888

Immunopure®(Fab’)2 制备试剂盒

Kit

20343

固相化胃蛋白酶

5 ml gel

44880

Immunopure® IgG1 Fab 和 (Fab’)2制备试剂盒

Kit

44881

固相化无花果蛋白酶

5ml

44889

半胱氨酸

5 g

44887

Immunopure® IgM片段化试剂盒

Kit

20408

巯基乙醇

6x6mg

 

美国Pierce公司

  

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